Tento 3D STED snímek zachycuje kompletní strukturu povrchu myšího oocytu se značením dvou povrchových proteinů.
Juno (zeleně) a CD9 (fialově) zvýrazňují jemné mikroklky na membráně oocytu.
Použité materiály: montovací médium AD-MOUNT C, montovací spacery AD-SEAL.
Proč je montovací médium tak důležité?
Biologické vzorky mění lom světla.
Buňky a tkáně jsou opticky nehomogenní – na rozdíl od skla nebo vody lámou světlo nerovnoměrně. Když se index lomu vzorku neshoduje s okolním prostředím, dochází k distorzi směru paprsků. Výsledek: rozmazané snímky, snížený kontrast a nechtěné haló efekty, které utopí jemné detaily.
Montovací média dělají obraz ostrý a stabilní.
Kvalitní montovací médium proniká hluboko do vzorku a opticky „vyrovnává“ tyto rozdíly. Minimalizuje nesoulad indexu lomu a zlepšuje tak ostrost a rozlišení. Zároveň chrání fluorescenční barviva před vyhasínáním a pomáhá zachovat intenzitu signálu – vzorek tak zůstává jasný a použitelný i po dlouhodobém skladování při 4 °C.
Pro nejlepší výsledky kombinujte s montovacími spacery.
Jednoznačně definují výslednou tloušťku vzorku, zabraňují jeho stlačení a zajišťují konzistentní podmínky pro snímání.
Chcete vědět víc?
Podívejte se na náš největší úspěch:
3D STED image of entire mouse oocyte
Zjistěte, jak příprava vzorku umožňuje neuvěřitelně čisté super-rezoluční zobrazení hluboko ve vzorku.
Nebo si stáhněte souhrnný protokol testu vyblednutí ve formátu PDF.
Podívejte se na krátké video s postupem:
Montáž preparátu
4 typy montovacích médií: H, F, S a C
Který typ je pro vás ten pravý?
Naší hlavní volbou jsou AD-MOUNT F (netuhnoucí) a AD-MOUNT H (tuhnoucí) – vysoce kvalitní montovací média, dostupná ve variantách s DAPI i bez. Obě varianty poskytují excelentní stabilizaci fluorescence, snadnou manipulaci a jsou plně srovnatelné se světovými standardy.
AD-MOUNT S představuje pokročilé médium s výjimečnými anti-fade vlastnostmi. Fluorescenční signál je v něm extrémně stabilní a odolný vůči fotoblednutí. U některých expresních proteinů může být signál slabší – doporučujeme proto médium nejprve vyzkoušet.
AD-MOUNT C je médium pro speciální použití. Nabízí index lomu odpovídající borosilikátovému sklu, čímž výrazně snižuje sférickou aberaci. Jeho mírný čiricí efekt pak umožňuje zcela projasnit i hluboko uložené struktury. Stejně jako u AD-MOUNT S může být signál expresních proteinů slabší – doporučujeme otestovat.
Pozor: není kompatibilní s barvením typu SiR.
AD-MOUNT H
Universal Application
Refractive index: 1.45
Hardening
All fluorophores
Univerzální tuhnoucí montovací médium pro všechny typy fluoroforů. Zajišťuje dlouhodobou stabilizaci struktur (např. aktinu barveného phalloidinem) a barviv, minimalizuje photobleaching a ztrátu fluorescence. Navrženo pro dlouhodobé uchování vzorků.
AD-MOUNT F
Universal Application
Refractive index: 1.45
Non-hardening
All fluorophores
Univerzální montovací médium kompatibilní se širokým spektrem fluoroforů. Minimalizuje photobleaching a ztrátu fluorescence, účinně zachovává integritu a tvar biologických struktur. Navrženo pro dlouhodobé uchování vzorků.
AD-MOUNT S
Superior Stability
Refractive index: 1.47
Non-hardening
Synthetic dyes
Montovací médium Superior Stability zajišťuje výjimečnou stabilizaci fluorescenčního signálu minimalizací photobleaching u všech běžně používaných syntetických barviv. Zachovává integritu a tvar biologických struktur. Navrženo pro dlouhodobé skladování vzorků.
AD-MOUNT C
Clear view
Refractive index: 1.518
Non-hardening
Synthetic dyes
Speciálně vyvinuto pro téměř absolutní kompenzaci sférické aberace. Vhodné pro vyskoko- a super-rezoluční mikroskopii.
Vysoký index lomu, prosvětlovací vlastnosti a stabilizace fluorescenčního signálu. Vhodné pro běžně používaná syntetické fluorofory. Nevhodné pro expresní proteiny a barvení typu SiR.